三)、试验结果:初代培养:使用本发明的消毒方法,消毒成功率能达到80%,诱导培养基萌芽率能达到90%,可以成功建立无菌再生体系。继代培养:使用本发明的增殖培养基,绣球组培苗增殖倍率能够达到8~10倍,组培苗高度一致,生长健壮。生根培养:使用本发明的生根培养基,绣球组培苗生根率能够达到95%,根系发达,健壮,可以成功用于移栽大棚。本发明所指ms培养基是murashige和skoog研制的培养基,其成分配方表见表1。1/2ms培养基是指大量元素含量为ms培养基的一半,其他成分用量相同。表1、ms培养基成分表本发明涉及的植物生长调节剂有:6-ba—6-苄氨基嘌呤;ga3—赤霉素;iba—吲哚丁酸,naa—萘乙酸。本发明中的诱导培养基、增殖培养基和生根培养基均为液体培养基。本具体实施方式的实施例均为本发明的较佳实施例,并非依此限制本发明的保护范围,故:凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化,均应涵盖于本发明的保护范围之内。无酚红培养基在细胞实验中减少了不必要的干扰。湖北基础培养基牌子
器)10升-120升Systec产品型号MediaPrep-10MediaPrep-20MediaPrep-30MediaPrep-45MediaPrep-65Medi品牌:Systec型号:Systec参考报价:面议转1452全自动培养基制备仪全自动批量制备和分装培养基系统仪器简介我公司自主研发的培养基制备仪采用**的搅拌技术,设定了消毒、加热、搅拌和制冷等步骤一体化程序,只需要再控制面板上进行简单的参数设定即可完成。根据真空高压下会增加水蒸气的沸点原理,采用品牌:恒奥型号:HMP-01参考报价:面议转0510【分享】ISO/TS11133-1:2000食品和动物饲料微生物学-培养基制备指南-实验室培养基制备质量保证通则ISO/TS11133-1:2000食品和动物饲料微生物学-培养基制备指南-实验室培养基制备质量保证通则ISO/TS11133-1:2000Microbiologyoffoodandanimalfeed品牌:安捷伦型号:1260Lnifntiy参考报价:20万-50万实验室培养基制备质量保证通则(中文和英文版)实验室培养基制备质量保证通则。湖北基础培养基牌子MEM培养基在细胞生物学研究中广泛应用。
若应用于植物培养中的液体培养基制作,可不用调节ph,用超纯水(ph为)充分溶解后定容,便可直接应用于大多数植物水培。培养实例1:哥伦比亚型拟南芥无菌苗培养(1)种子保存及消毒方法:a、拟南芥种子保存方法:哥伦比亚(col,columbia)型拟南芥种子成熟后,收取种子于,加入3-8颗变色**干燥剂,用封口膜密封后置于4℃长期保存;b、拟南芥种子**消毒方法:取出经低温干燥保存的种子,于无菌环境下,将适量种子置于无菌,加入适量体积的无菌水,将离心管颠倒几次后用低速离心机离心10s,小心倒掉上清,重复3次;加入75%酒精,将离心管颠倒几次后用低速离心机离心10s,小心倒掉上清;用无菌水清洗3次,低速离心10s后去除上清;加入适量体积的5%naclo溶液,将离心管上下颠倒10-20次,低速离心10s后倒掉上清,重复2次;用无菌水清洗3次,低速离心10s后去除上清;加入无菌水,使种子完全浸泡在无菌水中,于4℃放置48h后播种。在种子质量良好的情况下,利用上述方法保存及消毒的无菌拟南芥种子,萌发率极高且几乎同时出苗。(2)生长培养基配制:1/2cs基本培养基+蔗糖30g/l+植物凝胶8g/l,用超纯水溶解,。1/2cs基本培养基的成分及用量如表1所示。。
微量元素在细胞内通常以与有机物结合的形式存在。其中铁在细胞中参与氧的转运;钴是维生素B12的组成部分,参与叶酸的合成和脂肪酸的合成;镍能够***脱氧核糖核酸酶、乙酰辅酶A合成酶等在细胞内具有重要功能的酶,还具有稳定核酸结构的功能;亚硒酸钠中的硒,作为谷胱甘肽过氧化物酶的辅基,具有抗过氧化物能力,参与消除细胞内的脂肪酸过氧化物,提高细胞的生长速率和活性。在低血清、无血清细胞培养基中,为满足细胞生长增殖需要,常常添加一些成份:蛋白质、多肽、核苷、嘌呤、柠檬酸循环的中间产物、脂类、及一些血清替代因子等。其中蛋白质具有重要的作用,动物细胞对许多物质(难溶于水的离子或脂类物质)的摄取需要借助蛋白质的传递作用,如白蛋白、传递蛋白、贴壁蛋白等能够携带脂肪酸、***、矿物质等促进细胞生长。转铁蛋白是一种重要的传递蛋白,能够结合铁,促进细胞对铁离子的吸收,并具有***作用,其促生长作用可能与其具有生长因子的功能有关。胰岛素可促进细胞对葡萄糖和氨基酸的利用,商业化中一些生长因子以重组蛋白形式添加到培养基中,主要用来刺激细胞增殖,并可促进糖元和脂肪酸的合成。乙醇胺是一种重要的刺激细胞生长的化合物,是脑磷酸的合成前提。DMEM培养基在组织工程中有重要应用。
如何正确地使用培养基及**大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长,对每个培养者都很重要。培养基的使用依不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。细胞培养液的构成细胞培养液指细胞生长的液体环境,一般指完全培养液,添加了血清、水解乳蛋白、各种添加剂等可以直接使用的培养液。细胞培养基&血清模式血清对于在传统培养基配方中生长和增殖的大多数细胞系来说是需要的,因为大多数单独的培养基并不能提供细胞生长所需要的全部营养,如MEM培养基,较为常用的量为5%~10%的比例,而特殊的低血清培养基血清量可降至3%左右,细胞的形态和功能不受影响。细胞培养基&乳欧液模式化学合成培养基现虽已大规模使用,但在某些培养领域水解乳蛋白仍在使用,以补充培养液中缺乏的氨基酸、小肽物质。较为常用的方式是用汉氏(Hanks’BSS)或欧式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白(一般为5‰浓度),即成乳汉(欧)液,再与化学合成培养基(一般为MEM)按比例混合使用(如1:1)。细胞培养基&各类添加剂(生长因子等)模式成分复杂的培养基还含有许多化合物,包括蛋白质、多肽、核苷、柠檬酸循环的中间产物、**酸及脂类等。DMEM培养基适用于多种哺乳动物细胞的体外培养和实验研究。广西减血清培养基供应商
减血清培养基减少了血清中的未知因素对细胞的影响。湖北基础培养基牌子
此法由巴斯德创立,用于酒类消毒而得名。目前用于牛乳消毒。方法有两种:一种为℃加热15秒,另一种为63-66℃加热30分钟。大多采用第一种方法。(2)煮沸法。在1个大气压下,水煮沸后温度达100℃,煮沸5分钟后可杀死一般**繁殖体。如于水中加入2%碳酸钠,可将其沸点提高至105℃,既可促进芽胞的杀灭,又可防止金属器皿生锈。(3)流通蒸气消毒法。又称常压蒸气消毒法,常用附诺(Amold)流通蒸气**器,利用1个大气压下100℃水蒸气进行消毒,10-30分钟后**繁殖体被杀死,但对芽孢作用不大。(4)间歇**法(fractionalsterilization)。采用间歇方式达到**目的。将**物品置于阿诺流通蒸气**器内,100℃加热15-30分钟,每日1次,连续3次。每次**后取出物品置37℃孵育箱过夜,致残存的芽胞发育成繁殖体,次日再通过流通蒸气**器加热而被杀灭。如此反复,既可杀灭芽胞,又可使不耐高温的物质免受影响。若某些物质不耐100摄氏度,则可将温度下降至75-80℃,每次加热时间延长到30-60分钟,常用血清凝固器对吕氏血清培养基和L-J培养基的**属此方法。(5)高压蒸气火菌法。利用密闭的耐高压蒸气**器(autoclave),在蒸气不外溢的条件下,使锅内压力增高,随之蒸气温度也增高。通常在℃。湖北基础培养基牌子
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